中央空調冷卻水軍團菌檢測方法簡介

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　　近些年冬天冷夏天熱，空調的使用率大大增加，但要當心空調冷卻水中的隱形殺手----軍團菌。由軍團菌引起的軍團菌病是非典型肺炎的重要組成部分，是一種暴發流行或散發流行的嚴重呼吸道傳染病，世人第一次認識軍團病是在1976年7月，那時美國費城召開了第56屆美國退伍軍人年會，與會者中有182人發生肺炎，事后在病人肺組織中接種分離出一種致病菌，這種病菌來自旅館的空調系統，以后醫學界將這種病菌命名為嗜肺軍團菌，把因這種病菌引起的疾病稱為軍團病。軍團菌是一種水中的細菌，不僅存在于自然界水中，也存在于污染的水塔水、熱水、礦泉水中。隨著我國人民生活水平的提高，尤其是大型建筑物，如賓館、醫院公共設施等中央空調系統的使用日益普遍，軍團病爆發流行的危險性也日益增加，因此了解和掌握空調冷卻水中軍團菌的檢測方法，在預防和控制軍團病的發生與流行中有十分重要的作用。現將其實驗室檢測方法作簡單介紹。本文由永安昌盛中央空調維修網的小編轉載于互聯網。

　　一、 細菌培養和鑒定

　　1.樣品處理：水樣中的菌經過濾膜或離心濃縮，為減少雜菌生長，濃縮樣品的一部分經酸處理與熱處理，一部分不做處理，將上述處理與未處理樣品分別接種GVPC瓊脂平板，在5% CO2，35~36℃環境下培養7一lOd。

　　2.初步鑒定：軍團菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍色或紫色，也能顯深褐 色、灰綠色、深紅色。軍團菌在GVPC選擇性平板上可形成直徑1～2 mm、灰白色、圓形、表面光滑、邊緣清楚整齊的菌落，在紫外燈下，有熒光，為革蘭氏陰性桿菌。在選擇性平板上挑選可疑菌落，接種于BCYE瓊脂平板和 BCYE-Cys平板進行傳代培養，36±1℃培養至少 2d，凡在前者上生長而在后者上不生長的即為軍團菌。

　　3.生化鑒定：常用的生化實驗有糖發酵試驗、淀粉水解試驗、觸酶試驗、明膠液化試驗、內酰胺酶試驗、硝酸鹽還原試驗、尿素酶試驗、馬尿酸鹽水解試驗等。

　　二、分型鑒定：采用軍團菌乳膠凝集試劑盒進行分型診斷，我國常見的型別有Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp9等。

　　三、PCR 法檢測菌株特異系性基因：主要檢測基因種類為軍團菌屬特異基因5sRNA、16sRNA和嗜肺軍團菌種特異基因Mip基因。

　　四、其他檢測方法：常用的方法有放射免疫法(R1A)、酶免疫法(EIA)、直接熒光抗體法(DFA)、免疫層析法(ICA)等多種方法;此外，核酸探針技術是近幾年發展起來的一種快速診斷軍團菌病原體的方法，根據軍團菌的核酸序列合成一段寡核苷酸，用同位素標記，并與被檢測核酸分子雜交，通過檢測放射性信號，確定軍團菌感染。這種方法具有特異性高，快速等優點。